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1985年1月11日から7月26日まで
テレビ朝日系
毎週金曜日22:00 - 22:54
朝日放送と松竹（京都映画撮影所、現・松竹撮影所）共同製作
全26話。主演は藤田まこと。
必殺シリーズの第23作、必殺仕事人シリーズの第5作、中村主水シリーズの第11作
仕事人
中村主水 演 - 藤田まこと 南町奉行所の定町廻り同心。表、裏での投げやりな態度も相変わらずだが、竜、政を仲間に加え、仕事に挑む。
何でも屋の加代 演 - 鮎川いずみ 何でも屋で、仕事人の密偵。金儲けは一段とセコくがめつくなり、誇張した守銭奴的キャラとして描写されている。一時期は首にギプスを巻いていた。 第4話以降は殺しの衣装に着替えて出陣する。最後の仕事を終えたあと、主水に見送られ江戸を去っていった。（第26話）
組紐屋の竜 演 - 京本政樹 組紐屋。中性的な外見の青年。伊賀の忍 九十九一族の出身で、抜け忍となり、江戸に渡って来た。 里の忍たちが自身を狙っていることを知った際は主水たちに迷惑を掛けたくないという一心で敢えて無愛想になり、江戸を抜けようとしたが、主水たちの協力で忍者軍団と戦い、九十九一族を葬った（第12話）。 最後の仕事を終えたあと、主水に見送られ江戸を去っていった。（第26話）
花屋の政 演 - 村上弘明 花屋。加代の借家の一階に住んでおり、加代に花屋の商売を手伝わせることがある。主水たちと組む前は竜とコンビを組み、裏の仕事を請け負っていた。 情に流されやすいが、初期は嫌味な部分もあった。曲がったことを嫌う熱血漢で、自身の身内が殺された時などは一人で暴走し、主水と対立することがあった。 最後の仕事の際、殺害相手を警護していた忍に顔を見られ、命を狙われたが生き延びており、主水・加代・竜が集まった場所に姿を見せた後旅立った。（第26話）
西順之助 演 - ひかる一平 西洋医学所に合格するため、日々、勉学に励む受験生。許婚のお新と玉助の執拗な求愛に辟易している。加代と同じく、第4話以降は殺しの衣装に着替えて出陣する。 最終話で、西洋医学所の試験に合格したのを機に仕事から外されるが、加代と合流し一緒に最後の仕事を遂行、その後長崎へ留学するために江戸を去るが、一人遠くから他の仲間の旅立ちを見送っていた。
おりく 演 - 山田五十鈴 仕事人の元締。今回は三味線屋を営まず、流しの三味線弾きとなっている。家も勇次と住んでいた店ではなく、荒れ寺に住んでいる。第11話を最後に姿を消す。 ただし、映画『必殺! ブラウン館の怪物たち』には登場している。裏の仕事のために京都へ旅立つが江戸の元締に先手を打つ為に、江戸へ一足先に戻っており、異人屋敷での死闘には参戦していない。
その他
中村せん 演 - 菅井きん 主水の姑。あいかわらず婿養子の主水をいびるが、第24話では主水に怒られてしまう。
中村りつ 演 - 白木万理 主水の妻。せんとともに、婿養子の主水をいびる。
筆頭同心 田中 演 - 山内としお 南町奉行所の筆頭同心で、主水の上司。いつも主水に怒鳴っている上、面倒な仕事は主水に押し付けている。 中性的な喋り方だがオカマという自覚はなく、第5話で玉助に懐かれた際はその気持ち悪さに引き気味であった。
溝呂木頼母 演 - 妹尾友信 南町奉行所の定町廻り同心。上司の田中が何か言うごとに「おっしゃる通りです」とお追従を並べる腰巾着的存在で、主水にとっては迷惑な人物。 ただし、主水を嫌っている訳ではなく、主水の意見に賛同することもある。
玉助 演 - 梅津栄 前作『必殺仕事人IV』から引き続き登場。順之助に付きまとうオカマの中年男性で、本作では神出鬼没に磨きが掛かり、様々な変装で現れるようになった。 順之助の受験合格には喜んでいたが、もう塾に来ることがないと知り、悲しんでいた。怒ると男の自我を取り戻し、怖い一面を見せる。
お新 演 - 灘陽子 順之助の両親が決めた許婚。早熟で色事に興味を持ち、お医者さんごっこと称して順之助に迫っては迷惑がられる。 順之助の前ではお淑やかな娘を装うが、勝気な性格で意外に腕っ節も強く、玉助が現れると本性をむき出しにした取っ組み合いの痴話喧嘩となることがあった。
西順庵 演 - 溝田繁
西巴 演 - 三浦徳子
第01話「主水、脅迫される」
第02話「主水、混浴する」
第03話「加代、ゴリムリンを売る」
第04話「主水 家をしめ出される」
第05話「主水、奉行所の人員整理にあわてる」
第06話「りつ、減量する」
第07話「主水、生体解剖に腰を抜かす」
第08話「加代、モグラ男夫婦にあてつけられる」
第09話「主水、キン肉オトコに会う」
第10話「主水 ヘソクリを盗まれる」
第11話「主水、送別会費を全額盗まれる」
第12話「組紐屋の竜 忍者と闘う」
第13話「主水、ヒヒ退治する」
第14話「主水、上役の田中と出張する」
第15話「主水、いじめられっ子になる」
第16話「主水、入院する」
第17話「加代 子守唄を歌う」
第18話「花屋の政 ワル仕事人と闘う」
第19話「加代、天才男と商売する」
第20話「主水、田植えする」
第21話「組紐屋の竜 右足を傷める」
第22話「主水、イッキ飲みする」
第23話「加代、五千両の金塊を拾う」
第24話「花屋の政 雷雨の中で闘う」
第25話「主水、源氏と平家に泣かされる」
第26話「主水、下町の玉三郎と出会う」
